Lignes directrices pour les techniques de désinfection et de stérilisation pour le remplacement des filtres à air à haute efficacité dans les enceintes de biosécurité

Le processus de désinfection et de stérilisation lors du remplacement des filtres HEPA/ULPA dans les enceintes de biosécurité est une étape essentielle de la biosécurité, visant à maximiser la protection des opérateurs et de l'environnement lors du démontage des anciens filtres susceptibles d'être contaminés par des agents pathogènes. Ce guide fournit des procédures opératoires rigoureuses et des points techniques.
principe de base
Considérez l'ensemble du processus de remplacement comme une opération de réparation d'un « appareil potentiellement infectieux ». Toutes les mesures techniques tournent autour de « l'emballage, de la purification et de la protection » pour garantir que les polluants sont efficacement tués et scellés pendant le processus d'exploitation.

Le but de cette étape est de réduire la charge biologique à l'intérieur du filtre et de la chambre, créant ainsi les conditions d'un démontage en toute sécurité.

Clarifier le niveau de risque : Déterminez l'agent pathogène de niveau de risque le plus élevé (tel que les micro-organismes BSL-2 ou BSL-3) que l'enceinte de sécurité a manipulé. Le plan de désinfection doit correspondre à ce niveau de risque.
Choisissez un désinfectant : choisissez un désinfectant à large-spectre, efficace et compatible en fonction du type d'agent pathogène. Les choix courants incluent :
Désinfectants contenant du chlore (tels qu'une solution de chlore efficace fraîchement préparée à 1 000-5 000 mg/L) : ont un fort pouvoir destructeur contre les bactéries, les virus et les spores fongiques, mais sont très corrosifs. Il est important d'éliminer soigneusement les résidus après le temps de contact.
Peroxyde d'hydrogène (tel qu'une solution de peroxyde d'hydrogène à 3-6 % ou un type composite) : large spectre, faible résidu, adapté à diverses surfaces.
70% -75% d'éthanol ou isopropanol : efficace contre la plupart des bactéries et virus, mais limité contre les virus et spores non enveloppés, couramment utilisés pour la désinfection préliminaire et auxiliaire.
Composés phénoliques : Diluer et utiliser selon les instructions.
Déterminez la méthode de désinfection : combinant généralement « essuyage/infusion de liquide » et « fumigation au gaz/vapeur » pour obtenir le meilleur effet.

Opération de purification : Avant le remplacement prévu, laissez fonctionner l'armoire de sécurité à pleine charge pendant au moins 30 minutes sans interférence (pour les situations à haut risque, il est recommandé de fonctionner pendant plus d'une heure), en utilisant le flux d'air interne pour capter les éventuelles particules en suspension sur le filtre.
Essuyage et désinfection des surfaces :
Portez un équipement de protection individuelle de base (blouses de laboratoire, gants, lunettes).
Utilisez un désinfectant approprié (tel que de l'alcool à 70 %) pour essuyer soigneusement toutes les surfaces à l'intérieur de l'armoire, y compris les parois intérieures, les établis, les fenêtres en verre, les grilles, etc., afin d'éliminer la contamination des surfaces.
Étape clé : Désinfection en profondeur de l'espace de travail (méthode de fumigation - fortement recommandée)
Il s'agit de la méthode de prétraitement-la plus efficace, capable de tuer les micro-organismes qui ne peuvent pas être capturés par le flux d'air et qui se déposent dans les coins et les surfaces.
Méthode : Dans le but d'assurer la sécurité, un générateur « VHP/H2O2 » peut être utilisé pour faire circuler la fumigation à l'intérieur de l'armoire, ou une fumigation au formaldéhyde peut être utilisée (en raison de problèmes de sécurité et d'environnement, elle est désormais rarement utilisée et nécessite un contrôle extrêmement strict).
Solution alternative simplifiée : en l'absence d'équipement professionnel, un tissu non tissé-imbibé d'un désinfectant à haute concentration (tel que du peroxyde d'hydrogène) peut être réparti uniformément sur la surface de la zone de travail après l'arrêt, et la fenêtre avant doit être fermée pour maintenir le contact pendant au moins 1 heure, créant ainsi un environnement local de vapeur à haute concentration.

L’opérateur remplaçant doit porter :
Vêtements de protection conjoints (de préférence jetables et résistants aux liquides).
Gants à double couche (gants d'examen médical à couche intérieure, gants en nitrile épais à couche extérieure).
Masque de protection N95 ou de niveau supérieur (lors de la manipulation d'agents pathogènes à haut -risque, un respirateur à filtre à alimentation en air motorisé (PAPR) doit être utilisé).
Lunettes ou écrans faciaux complets.
couvre-chaussures
Préparez des sacs pour déchets biologiques dangereux, des conteneurs de désinfectant et du ruban adhésif.

Le but de cette étape est d'atteindre « zéro fuite » ou « minimiser les fuites » lors du démontage et de l'enlèvement des anciens filtres.

Verrouillage hors tension : Après avoir terminé la fumigation ou la désinfection des contacts, débranchez complètement l'alimentation électrique de l'armoire de sécurité et verrouillez-la avec une étiquette.
Désinfection liquide secondaire : une fois que l'opérateur porte un ensemble complet d'EPI, ouvrez la fenêtre avant et essuyez à nouveau la zone à toucher avec un désinfectant (tel que le cadre du filtre, le dispositif de fixation, la poignée de l'outil).

Il s’agit de la technologie de base pour empêcher les polluants de s’échapper.
Préparez un emballage à double-couche : ouvrez un grand sac épais pour déchets biologiques dangereux dans la zone de travail sécurisée de l'armoire ou à côté de son ouverture.
Démontez le dispositif de fixation : retirez soigneusement la bande de pression, la fixation, etc. du filtre et trempez toutes les petites pièces dans un petit récipient contenant du désinfectant.
Retirer et sceller immédiatement :
Deux personnes collaborent, l'une desserrant soigneusement le filtre d'un côté et l'autre le stabilisant.
Faites glisser l'ancien filtre directement et doucement dans la première couche préparée du sac pour risques biologiques.
Action clé : lorsque le filtre est entièrement entré dans le sac mais n'a pas encore touché le fond, aidez le personnel à envelopper et à serrer immédiatement l'ouverture du sac vers le haut depuis l'extérieur, minimisant ainsi les perturbations de l'air à l'intérieur du sac.
Vaporisez l’ouverture du sac avec un désinfectant, puis l’opérateur principal attache fermement l’ouverture du sac de l’intérieur avec des attaches zippées ou du ruban adhésif.
Scellement de la couche externe : placez le sac scellé de la première couche dans le deuxième sac pour risques biologiques, vaporisez un désinfectant sur l'ouverture du sac et attachez-le fermement par du personnel externe.
Désinfection des surfaces : vaporisez immédiatement du désinfectant sur la surface extérieure du sac double-couche.

Après avoir retiré et scellé l'ancien filtre, essuyez et rincez immédiatement tous les espaces internes exposés tels que la rainure d'installation du filtre, le boîtier de pression statique, la chambre du ventilateur, etc., soigneusement et abondamment avec un désinfectant.
Trempez tous les panneaux de revêtement intérieur, panneaux diffuseurs et autres composants démontés dans un désinfectant.
Gardez le désinfectant en contact avec la chambre pendant une durée suffisante (généralement 20 à 30 minutes).
Essuyez avec de l'eau stérile ou un chiffon non pelucheux trempé dans de l'eau propre pour éliminer les résidus de désinfectant (en particulier les désinfectants corrosifs), et séchez avec un chiffon propre ou laissez sécher à l'air libre.

Utilisez l'ancien filtre scellé à double couche-comme déchet infectieux hautement dangereux et envoyez-le à une stérilisation à haute-pression dès que possible, conformément aux réglementations de biosécurité du laboratoire.
Le sac de stérilisation doit être clairement étiqueté « Filtre HEPA pour déchets de l'armoire de biosécurité - contaminé ».
Il est strictement interdit de le jeter ou de l'ouvrir avec les déchets ordinaires sans stérilisation.

Après avoir confirmé que la chambre d'installation a été nettoyée et séchée, un nouveau filtre peut être installé.
Après l'installation, un professionnel doit effectuer un « test d'étanchéité par analyse d'intégrité post-installation », qui est le seul critère permettant de vérifier la réussite du processus d'installation et de désinfection sans contaminer le nouveau filtre. Ce n'est qu'après avoir réussi l'inspection que l'armoire de sécurité peut être réactivée.
Principales précautions et tabous
Interdiction du fonctionnement à sec : Il est strictement interdit de démonter et de retirer directement le filtre sans aucun traitement de désinfection.
Interdiction de l'opération par une seule personne : deux personnes doivent collaborer, avec une personne comme opérateur principal et une personne assistant au passage des outils et au scellement.
Interdiction d'une protection insuffisante : En aucun cas les normes des EPI ne doivent être abaissées.
Contrôle environnemental : effectué dans un endroit bien ventilé, de préférence dans la zone centrale d'un laboratoire de biosécurité.
Plan d'urgence : Préparez un kit de traitement des déversements et clarifiez les procédures d'intervention d'urgence en cas de contamination accidentelle (telle qu'une rupture de sac).
Processus récapitulatif
Évaluer les risques → Sélectionner les désinfectants → Fumigation/désinfection à l'intérieur de l'armoire → Protection avancée du personnel → Panne de courant → Désinfection secondaire → Sceller et retirer l'ancien filtre dans un sac → Désinfection finale de la chambre → Stérilisation haute pression de l'ancien filtre → Installation du nouveau filtre → Vérification obligatoire de la détection des fuites → Enregistrer et archiver.
Pour la grande majorité des laboratoires, en particulier ceux traitant des agents pathogènes BSL-2 et supérieurs, il est fortement recommandé de sous-traiter ce travail à des prestataires de services d'armoires de biosécurité possédant une riche expérience et un équipement de désinfection professionnel. Ils peuvent fournir des procédures opérationnelles de sécurité standardisées, des équipements de fumigation professionnels et supporter les risques de biosécurité correspondants, ce qui en fait un choix plus fiable et plus conforme.